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            甘薯脫毒種苗-甘薯原原種的繁育
            發表時間:2018-8-25 14:30:29 閱讀:2413

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                   甘薯(學名:Dioscorea esculenta (Lour.) Burkill):又名甜薯,旋花科薯蕷屬纏繞草質藤本植物。為我國主要栽培作物之一,是飼料和輕工業制品的重要原料,我國甘薯的種植面積常年保持在7500-8000萬畝以上,占全國耕地總面積的4.2%,總產量超過1億噸,是世界上最大的甘薯生產國。因此提高甘薯單位面積產量對我國甘薯的生產具有重要的現實意義。近些年來,由于甘薯病害的影響,甘薯的增產幅度降低,某些地區甚至出現了甘薯產量大幅下降的現象,研究表明,甘薯病毒病的危害是主要的原因,感染病毒后的甘薯表現為:薯塊變小,品質變差,產量下降等癥狀。這些表現與甘薯的生物學特性和病毒的寄生有關,甘薯為無性繁殖作物,品質的遺傳特性是靠薯塊代代傳遞的,薯塊中大量的營養物質和水分,即為世代的繁衍提供了重要的營養物質,也為病毒的生存和繁殖提供了養分。要防治甘薯病毒病的危害,最根本的辦法是除掉薯塊中存在的病毒,獲取無病毒植株。

            一、甘薯病毒病

            1、甘薯病毒病的癥狀

                  甘薯病毒病癥狀與毒原種類、甘薯品種、生育階段及環境條件有關。主要有以下幾種表現:

            • 葉片褪綠斑點型苗期及發病初期葉片產生明脈或輕微褪綠半透明斑,生長后期,斑點四周變為紫褐色或形成紫環斑,多數品種沿脈形成紫色羽狀紋。

            • 花葉型苗期染病初期葉脈呈網狀透明,后沿葉脈形成黃綠相間的不規則花葉斑紋。

            • 卷葉型葉片邊緣上卷,嚴重時卷成杯狀。

            • 葉片皺縮型病苗葉片少,葉緣不整齊或扭曲,有與中脈平行的褪綠半透明斑。

            • 葉片黃化型形成葉片黃色及網狀黃脈。

            • 薯塊龜裂型薯塊上產生黑褐色或黃褐色龜裂紋,排列成橫帶狀或貯藏后內部薯肉木栓化,剖開病薯可見肉質部具黃褐色斑塊。

            2、侵染甘薯的病毒類型

                  目前全世界已報道的甘薯病毒有十幾種,在我國主要以甘薯羽狀斑駁病毒(SPFMV)、甘薯潛隱病毒(SPLV)和甘薯退綠斑病毒(SPCFV)危害最重。在中華人民共和國行業標準《甘薯脫毒種薯 NY T 1200-2006》中明確規定甘薯脫毒試管苗不得檢出上述三種病毒。

                  甘薯羽狀斑駁病毒(SPFMV),此病毒主要侵染旋花科甘薯屬植物。為線狀病毒,病毒粒體長度為830-850nm,基因組為單鏈RNA,可通過汁液摩擦、嫁接方式進行傳播,并可經蚜蟲(桃蚜和棉蚜)以非持久性方式傳播,常與其他病毒共同存在,復合感染。

            SPFMV侵染甘薯產生的癥狀可因寄主、環境條件以及株系的不同而不同。一般造成褪綠斑或具紫邊的不明顯或明顯的褪綠斑(紫環斑),也可沿葉脈形成紫色羽狀斑紋。癥狀主要在老葉上可觀察到,有時也有隱癥侵染現象。此病毒部分株系可在某些甘薯品種表面或內部形成褐色龜裂或木栓化。在指示植物上觀察到的主要癥狀是明脈、沿脈變色、褪綠斑以及中脈扭曲等癥狀。但癥狀可以很輕微,而且最早萌發的葉片可能無癥狀,不同葉位表現的癥狀也不相同。

                  甘薯潛隱病毒(SPLV),此病毒首次發現于我國臺灣省,病毒粒子為彎曲長桿狀,長約700~750nm,此病毒主要通過汁液摩擦接種傳播,蚜蟲和白粉虱都不能傳播此病毒。被此病毒侵染的甘薯品種多數并不產生明顯的葉部癥狀,只產生輕度的斑駁。該病在苗床期和大田生長期均可發生。一般苗床期癥狀輕微或不明顯。而夏季高溫時癥狀消失呈隱癥現象,秋后隨著溫度的降低,癥狀又重新出現,常見的有局部褪綠斑駁(黃綠相間、深綠與淺綠相間的花葉);葉片小,葉面皺縮不平。嚴重的在葉片上有庖斑。

                  甘薯退綠斑病毒(SPCFV),此病毒屬于長線病毒科毛形病毒屬成員。最早報道于20世紀70年代,主要分布在亞洲和南美洲。其單獨侵染甘薯時產生的癥狀比較輕微,表現為葉片褪綠、植株矮化、中下部葉片變紫色或黃化,通?墒垢适頊p產50%。

            二、莖尖分生組織脫毒培養

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            1、催芽取材

                   在進行莖尖脫毒之前,我們應該首先進行品種的選擇。品種必須是在當地廣泛種植,有一定的種植年限,品質優良,產量穩定、適應性好、品質純度高的品種。關于取材有兩種方法:一是在甘薯的生長季節在大田進行取材,頂芽和腋芽均可。二是利用薯塊進行人工催芽的方式進行。由于前者存在消毒不徹底、污染率低、病毒去除不徹底的問題,所以往往采用后者進行材料的獲取。具體辦法為將洗凈的高溫處理過的薯塊排好在沙床中發芽,待芽長至3-5cm時,即可切取莖芽分生組織。

            2、消毒接種

                   切取1-2cm長的頂端組織,在流動的自來水下沖洗1-2小時,然后使用75%的酒精浸泡10-20s,無菌水沖洗一次,接下來使用0.1%的升汞溶液浸泡5-8min,最終使用無菌水沖洗3-5次。將消過毒的材料置于解剖鏡下,使用解剖針剝去外部幼葉及大的葉原基,切取帶有1-2個葉原基的、長度為0.3-0.4mm的莖尖分生組織,迅速接種到預先準備好的培養基中。

            3、培養再生

                   將接種好的莖尖分生組織置于25±2℃、光照3000-5000lux、光照時間為12-14小時的環境下進行培養。大約15-20天后,肉眼可見白色生長點發芽轉綠,此時將發芽轉綠的莖尖組織轉移到不含任何激素的MS培養基上進行培養,經過50天左右的培養后,可以得到5-6片葉片的幼苗。接下來進行同莖尖株系切段繁殖,并對同一株系的植株同一編號,以免混雜。

            4、病毒檢測

                   甘薯脫毒苗的病毒檢測主要使用酶聯免疫檢測法和指示植物法?梢宰孕匈徶迷O備進行自檢也可以委托第三方進行檢測,關于檢測的方法與步驟,本方案不再詳述。

            對于酶聯免疫法檢測結果顯陽性的株系,要全部舍棄不可繼續保留。對于檢測結果顯陰性的株系,繼續保留進行快繁。經酶聯免疫和指示植物共同顯示沒有問題的種苗才可確定為無病毒苗。無病毒種苗還需要進行種性的鑒定,種性鑒定沒問題的株系可以混合在一起進入無性快繁階段。

            5、無性快繁

                   利用植物組織培養技術將病毒檢測、種性鑒定沒問題的種苗進行瓶內擴繁。計算好出苗時間和數量,選擇好合適的培養基,控制好培養環境以減低污染苗的出現。待數量達到預期值,即可擇機出苗。

            三、甘薯原原種的繁育

            1、場地選擇

                   生產甘薯原原種必須要在隔離防蟲網棚內進行。防蟲網棚是繁育原原種的重要條件之一,且所用防蟲網的網眼必須在40目以上,這樣蚜蟲就不能通過可以大大減少蚜蟲傳播病毒的機會。同時所用地塊必須是無病原土壤,最好選用多年未栽種過甘薯的土壤。

            2、種苗定植

                   在3月中旬將5-7片葉的脫毒試管苗打開瓶口,室溫下加光照煉苗5-7天。栽前頭天下午在棚內苗圃上撤上用100克40%樂果乳油加水2.5-5千克稀釋后與15-25千克干餌料拌成的毒餌,以消滅地下害蟲。因防蟲網棚內光照較弱,通風透氣性較差,很容易造成旺長。因此,繁殖原原種時,栽插密度不易太高,一般以每畝4000株為宜。

            3、種苗管理

                   在繁育甘薯原原種的過程中,要始終貫穿防止病毒再侵染的意識。在網棚內種植一些指示植物,每1-2個星期噴灑1次防治蚜蟲的藥劑。最好是多種藥劑輪換使用,以免蚜蟲產生抗藥性,達不到防治效果。 原原種收獲時要逐株觀察是否有病毒癥狀,一旦發現病株要堅決拔除,以確保原原種質量。如果網棚內所種植的指示植物表現病毒癥狀,整個棚內所繁殖的種薯應降級使用。

             

            四、原原種薯收獲與儲存

            1、當地溫穩定在15℃時,適時收獲。剔除病、爛等無種用價值的塊根,不同品種單收單放,不可混雜。

            2、使用編織袋包裝并懸掛識別標簽(品種、級別等信息)。

            3、運輸過程中,應防止機械碰傷、防雨、防凍害。

            4、入窖20天內要注意排濕、降溫,溫度降至13-15℃,相對濕度95%以下。

            5、入窖20天后,保持窖溫12-14℃,不低于10℃,相對濕度保持在85-90%?梢栽谑矶焉细采w草簾等吸濕物。

            6、儲存期間注意防止鼠害。

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